離子色譜儀是如何檢測(cè)糖的呢
點(diǎn)擊次數(shù):2580 更新時(shí)間:2021-03-29
離子色譜儀是高效液相色譜的一種,是分析陰陽(yáng)離子的一種液相色譜方法,該方法具有選擇性好、靈敏、快速、簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn),并且可以同時(shí)測(cè)定多種組分。其有別于傳統(tǒng)離子交換色譜柱色譜的主要是樹(shù)脂具有很高的交聯(lián)度和較低的交換容量,進(jìn)樣體積很小,用柱塞泵輸送淋洗液通常對(duì)淋出液進(jìn)行在線(xiàn)自動(dòng)連續(xù)電導(dǎo)檢測(cè)。
離子色譜是一種高效液相色譜,也稱(chēng)為高效離子色譜或現(xiàn)代離子色譜。與傳統(tǒng)的離子交換柱色譜不同,該樹(shù)脂交聯(lián)度高、交換容量低、進(jìn)樣量小。當(dāng)用柱塞泵輸送洗脫液時(shí),通常要對(duì)洗脫液進(jìn)行在線(xiàn)自動(dòng)連續(xù)電導(dǎo)率檢測(cè)。
從水中常見(jiàn)糖類(lèi)的pKa值可以看出,常見(jiàn)的單糖、二糖和糖醇的pKa值一般在L2-14之間,常見(jiàn)的糖醛酸和糖胺的pKa值小于7。當(dāng)堿性溶液的酸堿度大于或等于L2時(shí),大多數(shù)糖基化以陰離子的形式存在,因此陰離子交換色譜柱可作為洗脫液分離強(qiáng)堿性溶液。
由于糖分子結(jié)構(gòu)的疏水部分,糖的分離機(jī)理不僅是陰離子交換,還有疏水吸附。碳水化合物在陰離子交換柱上的保留容量主要取決于其電荷數(shù)、分子大小、組成和結(jié)構(gòu)。
離子色譜儀是一種檢測(cè)技術(shù),它測(cè)量電化學(xué)活性物質(zhì)在適當(dāng)?shù)耐饧与娢幌掳l(fā)生氧化或還原反應(yīng)時(shí)電流的變化。糖的分離是在堿性條件下進(jìn)行的,而金電極的檢測(cè)條件通常是堿性的。金電極表面可以為糖的電化學(xué)氧化提供反應(yīng)環(huán)境。因此,金電極檢測(cè)與陰離子交換分離有很好的匹配。由于糖的氧化產(chǎn)物會(huì)覆蓋電極表面,造成不可逆的污染,因此需要選擇不同的外加電位對(duì)電極表面進(jìn)行清洗和活化,使電極能夠連續(xù)工作。